material eta metodoak

A)  HAZKUNTZA INGURUNEEN PRESTAKUNTZA

Tresnak	Espatula, balantzea, erloju-beira, matraze aforatua, imana, plaka berogailua, kotoia, zetazko oihala, aluminiozko papera, labea, autoklabea, errotulkia
Erreaktiboak	MRS agarra, agar nutritiboa, McConkey agarra, ur distilatua (Cultimed, Panreac)

i.             Materialak

ii.            Metodoak

1-   Ikerketa lan esperimentala egiten hasi baino lehen erabiliko den materiala garbitu eta esterilizatu. Horretarako, labea eta mahaia alkoholez garbitu.

2-   5,75g NA disolbatu 250ml uretan

3-   Imana sartu eta irabiatzen joan agitadorearen laguntzaz berotzen doan bitartean.

4-   Kotoi bola bat egin eta oihalaz inguratu gogor

5-   Autoklabean sartu

6-   Berdina egin MRS-areki, baina kasu honetan 15,5g 250ml-tan disolbatuz

7-   McConkey-arekin ere prozedura berdina erabili, baina 12,5g-rekin

B)  BAKTERIOEN ISOLAMENDUA HAZKUNTZA INGURUNE HAUTAKORRETAN

a)   Produktu laktikoetan dauden bakterioak: NA eta MRSren arteko konparaketa

i.             Materialak

Laginak	Esnea, RAM; jogurt arrunta, naturala, Danone; Activia jogurta, Danone
Tresnak	Ereitze makila, bunsenen pizgailua, pizgailu arrunta
Erreaktiboak	Alkohola, MRS agarra, NA

ii.            Metodoak

1-   Bunsenen metxeroa piztuta dagoela ereitze makila esnean busti eta plaketan sakabanatutako puntutxoak jarri

2-   Makila garbitu era Activia jogurtean sartu gero plaketan puntutxoak jartzeko

3-   Berriro garbitu makila eta berdina egin jogurt arruntarekin

b)   Bakterio patogenoen isolamendua: McConkey hazkuntza ingurune hautakorra

i.             Materialak

Laginak	Lauroko putzu bateko ura, zistitisa duen gaixo baten gernua
Tresnak	Petri plaka, bunsenen pizgailua, alkoholezko pizgailua
Erreaktiboak	Alkohola, McConkey agarra

ii.            Metodoak

1-Ereiketa makila gernuan busti eta plaketan sakabanaturiko puntutxoak jarri

2-Berdina egin, baina gernuarekin

C)  ISOLATURIKO BAKTERIOEN IDENTIFIKAZIOA

a)   Produktu laktikoetako bakterioen ezaugarriak

·   Katalasaren froga

i.             Materialak

Laginak	MRS-an lortutako bakterioak, NA-n lortutako bakterioak
Tresnak	Tantagailua
Erreaktiboak	Ur oxigenatua (H2O2)

ii.            Metodoak

1-Ur oxigenatu tanta batzuk bota bakterioen gainetik.

·   Tindaketa bakuna

i.             Materialak

Laginak	MRS-an lortutako bakterioak, NA-n lortutako bakterioak
Tresnak	Porta, zotza, mikroskopioa
Erreaktiboak	Metileno urdina, inmersio olioa

ii.            Metodoak

1-Bakterioak portan zabaldu eta sikatzen utzi

2-Metileno urdina bota eta 10 minutuz eduki

3-Inmersio olioa bota begiratu nahi den lekuan

4-Mikroskopioaz behatu

·   Gram tindaketa

i.             Materialak

Laginak	MRS-an lortutako bakterioak, NA-n lortutako bakterioak
Tresnak	Porta, zotza, mikroskopioa
Erreaktiboak	Kristal morea, lugol, alkohola, safranina, inmersio olioa

ii.            Metodoak

1-Zoztzaren bakterioak hartu eta portan zabaldu

2-Sikatutakoan, kristal morea bota eta minutu batez eduki

3-Garbitu eta lugola bota (hiru minutuz eduki)

4-Garbitu eta alkohola bota (20 segunduz eduki)

5-Garbitu eta safranina bota (30 segunduz eduki)

6-Garbitu eta mikroskopioan behatu inmersio olioa botata

b)   Bakterio patogenoen identifikazioa

·   Gram tindaketa

i.             Materialak

Laginak	MRS-an lortutako bakterioak, NA-n lortutako bakterioak
Tresnak	Porta, zotza, mikroskopioa
Erreaktiboak	Kristal morea, lugol, alkohola, sufranina, inmersio olioa

ii.            Metodoak

1-Zotzaren bakterioak hartu eta portan zabaldu

2-Sikatutakoan, kristal morea bota eta minutu batez eduki

3-Garbitu eta lugola bota (hiru minutuz eduki)

4-Garbitu eta alkohola bota (20 segunduz eduki)

5-Garbitu eta safranina bota (30 segunduz eduki)

6-Garbitu eta mikroskopioan behatu inmersio olioa botata

D)  BAKTERIOEN KOKULTIBOAK

a)   Gernutik isolaturiko bakterioak MRS-an lorturiko laktikoekin batera haztea

i.             Materialak

Laginak	McConkey-n lortutako gernuko bakterioak, MRS-an lortutako bakterio laktikoak
Tresnak	Eraiteko makiltxoa

ii.            Metodoak

1-Makilarekin MRS-an lorturiko bakterioak hartu eta McConkey-n jarri, kolonien gainean

b)   Ur zikinean lortutako bakterioak MRSan lorturiko laktikoekin batera haztea

i.             Materialak

Laginak	McConkey-n lortutako ur zikineko bakterioak, MRS-an lortutako bakterio laktikoak
Tresnak	Eraiteko makiltxoa

ii.            Metodoak

1-Makilarekin MRS-an lorturiko bakterioak hartu eta ur zikinekoen kolonien gainean jarri.